Amidase (AMD)
Mga Enzyme:Mga macromolecular biological catalyst, karamihan sa mga enzyme ay mga protina
Amidase:I-catalyze ang hydrolysis ng iba't ibang endogenous at foreign aliphatic at aromatic amides sa pamamagitan ng paglilipat ng acyl group sa tubig na may kasamang produksyon ng mga free acid at ammonia. Ang mga hydroxamic acid at iba pang organic acid ay malawakang ginagamit bilang gamot dahil ang mga ito ay bumubuo ng mga growth factor, antibiotics at tumor inhibitors. Ang mga amidase ay maaaring hatiin sa R type at S type acylases ayon sa stereoselectivity ng catalyst.
Bukod sa pag-catalyze sa hydrolysis ng mga amide, maaari ring i-catalyze ng amidase ang mga reaksyon ng acyl transfer sa presensya ng mga co-substrate tulad ng hydroxylamine.
Ang mga amidase na may iba't ibang pinagmulan ay may iba't ibang substrate specificity, ang ilan sa mga ito ay maaari lamang mag-hydrolyze ng mga aromatic amide, ang ilan sa mga ito ay maaari lamang mag-hydrolyze ng mga aliphatic amide, at ang ilan ay nag-hydrolyze ng α-o ω-amino amide. Karamihan sa mga amine ay may mahusay na catalytic activity para lamang sa mga acyclic o simpleng aromatic amide, ngunit para sa mga complex aromatic, ang mga heterocyclic amide, lalo na ang mga amide na may ortho substituents, ay karaniwang mababa sa aktibidad (ilang enzyme lamang ang nagpapakita ng mas mahusay na catalytic effect).
Mekanismo ng katalitiko:
| Mga enzyme | Kodigo ng Produkto | Kodigo ng Produkto |
| Pulbos ng Enzyme | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | isang set ng 19 na amidase, 50 mg bawat isa 19 na item * 50mg / item, o iba pang dami |
| Kit ng Pagsusuri (SynKit) | ES-AMD-1900 | isang set ng 19 na amidase, 1 mg bawat isa 19 na item * 1mg / item |
★ Mataas na espesipisidad ng substrate.
★ Malakas na selektibidad ng chiral.
★ Mataas na kahusayan sa conversion.
★ Mas kaunting mga by-product.
★ Mga kondisyon ng banayad na reaksyon.
★ Mabuti sa kapaligiran.
➢ Dapat isagawa ang enzyme screening para sa mga partikular na substrate dahil sa espesipisidad ng substrate, at kumuha ng enzyme na mag-catalyze sa target na substrate na may pinakamahusay na catalytic effect.
➢ Huwag kailanman madikit sa matinding mga kondisyon tulad ng: mataas na temperatura, mataas/mababang pH at organic solvent na may mataas na konsentrasyon.
➢ Karaniwan, ang sistema ng reaksyon ay dapat magsama ng substrate, buffer solution (Ang pinakamainam na pH ng reaksyon ng enzyme). Ang mga co-substrate tulad ng hydroxylamine ay dapat na naroroon sa sistema ng reaksyon ng acyl transfer.
➢ Ang AMD ay dapat idagdag nang huli sa sistema ng reaksyon na may pinakamainam na pH at temperatura ng reaksyon.
➢ Lahat ng uri ng AMD ay may iba't ibang pinakamainam na kondisyon ng reaksyon, kaya ang bawat isa sa mga ito ay dapat na pag-aralan pa nang paisa-isa.
Halimbawa 1(1):
Aktibidad ng hydrolysis sa iba't ibang Amide Substrates
| Substrate | Tiyak na aktibidad μmols min-1mg-1 | Substrate | Tiyak na aktibidad μmols min-1mg-1 |
| Asetamida | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamida | 0.8 |
| Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| Hexanamide | 6.4 | Nikotinamida | 1.7 |
| Sikloheksanamida | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
| Akrilamida | 10.2 | Pikolinamide | 2.1 |
| Metakrilamida | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Isinagawa ang reaksyon sa 50 mM sodium phosphate buffer solution, pH 7.5, sa 70 ℃.
| Mga Amida | Hidroksilamine | Hydrazine |
| Asetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Isinagawa ang reaksyon sa 50 mM sodium phosphate buffer solution, pH 7.5, sa 70 ℃.
Kaugnay na konsentrasyon ng reagent: mga amide, 100 mM (benzamide, 10 mM); hydroxylamine at hydrazine, 400 mM; enzyme 0.9 μM.
Halimbawa 2(2):
Halimbawa 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al. Biyokimika ng Proseso, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al. Bioorganic Chemistry, 2017, Makukuha online 7.
